Laboratoriokäsikirja
Tutkimukset aakkosjärjestyksessä
Progesteroni (S/HP)
Progesteroni on keltarauhasen erittämä hormoni. Koirilla sen pitoisuus alkaa suurentua proestruksessa hieman ennen luteinisoivan hormonin (LH) voimakasta pitoisuuspiikkiä. Ovulaation aikana pitoisuus on jo huomattavasti suurentunut ja suurenee edelleen hedelmöittymiseen asti. Progesteronipitoisuus säilyy suurentuneena myös tiineyden aikana.
Progesteronitaso nousee koirilla hyvin yksilöllisesti. Selkeimmin tulos on tulkittavissa välillä 5 -10 ng/ml. Matalista tuloksista (1–4 ng/ml) tulevan oikean ajankohdan arviointi perustuu aina keskimääräisiin hormonitasojen muutoksiin. Parhaiten se onnistuu, kun koiran normaali sykli on entuudestaan tiedossa. Tuloksen ollessa 2–3 ng/ml, on ovulaatioon aikaa keskimäärin 2 vuorokautta ja tuloksella 3–4 ng/ml keskimäärin 1 vrk.
Naudoilla veren progesteronipitoisuutta voidaan käyttää kiimantarkkailun apuvälineenä samoin kuin maidostakin mitattuna. Ovulaation aikana veren progesteronipitoisuus on hyvin matala (n. 0,2 ng/ml). Viikon kuluessa ovulaatiosta progesteronitaso nousee 1–5 ng/ml. Kahden viikon ajan taso säilyy yli kahden nanogramman. Tiinehtyneillä lehmillä taso säilyy korkealla (> 3 ng/ml), mutta tyhjiksi jääneillä lehmillä pitoisuus laskee 21 vuorokauteen mennessä alle 0,4 ng/ml.
Vastausaika:
Näytteensaapumispäivänä.
Näytetyyppi:
Seerumi tai Li-hepariiniplasma 0,5 ml. Eroteltu näyte säilyy jääkaapissa 4 vrk ja pakastettuna -20 °C vähintään 3 kk. Suositellaan paastonäytettä, koska lipemia häiritsee määritystä ja saattaa alentaa tuloksia merkittävästi. Tuloksen mukana ilmoitetaan, mikäli näytteessä on lipemiaa. Geeliputkien käyttöä ei suositella, koska geeli laskee tulostasoa.
Menetelmä:
Immunoluminometrinen määritys, joka mittaa kokonaisprogesteronipitoisuutta (P4).
Ristireagointi:
- Pregnenolone (P5) 0.047 %
- Androstenedione 0.076 %
- Corticosterone 0.417 %
- Cortisol 0.003 %
- Danazol 0 %
- 11-Deoxycorticosterone 1.82 %
- 11-Deoxycortisol 0 %
- Estradiol 0 %
- 17alfa-Hydroxyprogesterone 0.444 %
- Medroxyprogesterone 0.029 %
- Testosterone 0.119 %
- Altrenogest (Regumate) 0 %
Tulkinta:
Huomioi tulosta tulkitessasi käytetty mittayksikkö.
Laskukaavat tuloksen muuntamiseksi eri yksikköön tarvittaessa:
- 1 ng/mL = 3.18 nmol/l
- 1 nmol/l = 0.314 ng/ml
Koira
- < 1.50 ng/ml proestrus
- 2.0–5.0 ng/ml LH-piikki
- 5.0–10.0 ng/ml estrus (ovulaatio)
- 15–20 ng/ml hedelmöittyminen
Kohdunkaula sulkeutuu progesteronitasolla 15–25 ng/ml, joten tässä vaiheessa ei astutus tai keinosiementäminen emättimeen enää yleensä tuota tulosta.
Hevonen
- Oestruksessa: < 1 ng/ml
- 3–4 vrk ovulaatiosta: > 4 ng/ml
- tiinehtymättömällä taso laskee 8–12 vrk ovulaatiosta oestruksen tasolle: < 1 ng/ml
Tiinehtymisen testaaminen suositellaan tehtäväksi 16–18 vrk ovulaatiosta, jolloin tulokset ovat helpoiten tulkittavissa.
Tiine tamma
Tamman progesteronieritys on poikkeuksellinen: Tiineyden edetessä tamman plasman progesteronipitoisuus laskee päinvastoin kuin muilla nisäkkäillä ja nousee vasta hieman ennen varsomista. Plasman progesteronipitoisuus alkaa laskea noin 125. tiineysvuorokautena ja on hyvin alhainen tai ei havaittavissa noin 160–200. tiineysvuorokaudessa.
- 12 vrk ovulaatiosta: > 2 ng/ml
- 21 vrk ovulaatiosta: 3–10 ng/ml
- 30–60 vrk ovulaatiosta: 4–10 ng/ml
- 60–110 vrk ovulaatiosta: 4–15 ng/ml
- > 110 vrk ovulaatiosta: 5–40 ng/ml
Tiineyden seurannassa kannattaa huomioida, että istukka muuttaa sikiön tuottamaa pregnenolonia (P5) progesteroniksi (P4). P5 ei juurikaan ristireagoi käytössä olevan menetelmän kanssa, mutta istukan jo muuttaman hormonin menetelmä tunnistaa. Regumate (altrenogest) ei näy mittauksessa.
Alpakka
- 7–8 vrk astumisesta: ovulaatio on tapahtunut, kun progesteronitulos on yli 2 ng/ml.
- 14 vrk astumisesta: tulos yli 2 ng/ml viittaa tiinehtymiseen
Koko tiineyden ajan tiineyden seurannassa: tulokset alle 2 ng/ml viittaavat tiineyden keskeytymiseen.
Synnytyksen lähestyessä: tiineyden aikaisesta laskenut tulos viittaa 2 viikon sisällä käynnistyvään synnytykseen. Taso laskee hyvin lähelle nollaa 24 tuntia ennen synnytystä.
Lähteet:
Margaret V. Root Kustritz, DVM, PhD. University of Minnesota College of Veterinary Medicine. Cvm 6949: Comparative theriogenology, Small animal course notes
Otavă G, Cernescu H, Mircu C, Igna V, 2007. Pregnancy diagnosis in cow using progesterone measurements. Lucrări Stiinłifice Medicină Veterinară Vol. Xl Özel G, Hayrettġn U, Özgür S. Possibilities of early pregnancy diagnosis using blood serum progesterone test in kilis cows.
J S Afr Vet Assoc. 1981 Sep;52(3):181–5. Plasma progesterone levels in the mare during the oestrous cycle and pregnancy.
Terblanche HM, Maree L. BET LABS Inc. 2009 1501 Bull Lea Rd, Ste 102, Lexington, KY–USA–40511–1209
Comparison of 2 enzyme immunoassays and a radioimmunoassay for measurement of progesterone concentrations in bovine plasma, skim milk, and whole milk. Colazo MG, Ambrose DJ, Kastelic JP, Small JA. Can J Vet Res. 2008; 72:32–36.
Accuracy of canine parturition date prediction from the initial rise in preovulatory progesterone concentration. Kutzlera MA, Mohammedb HO, Lambb SV, Meyers-Wallena VN. Theriogenology. 2003; 60(6): 1187–1196.
Plasma LH and progesterone levels before and after ovulation and observation of ovarian follicles by ultrasonographic diagnosis system in dogs. Journal of Veterinary Medical Science. Hase M, Hori T, Kawakami E, Tsutsui T. 2000; 62 (3): 243-248.
Achieving canine pregnancy by using frozen or chilled extended semen. Linde-Forsberg C. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice. 1991: 21(3): 467-485.
Wynn, Michelle Arelia Ann, ”Biology and Detection of Pregnanes During Late Gestation in the Mare” (2017). Theses and Dissertations-Veterinary Science. 28.
TAMMAN ISTUKAN KEHITTYMINEN JA TOIMINTA SEKÄ ISTUKAN INFEKTIOT, Petra Huhti. Eläinlääketieteen lisensiaatin tutkielma, Kotieläinten lisääntymistiede, Kliinisen tuotantoeläinlääketieteen osasto, Eläinlääketieteellinen tiedekunta Helsingin Yliopisto 2014
Päivitetty: 6.5.2024